生物实验室污染排除干货分享

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生物实验室污染排除干货分享

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生物实验室污染排除干货分享

实验室污染是生物研究中常见但严重的问题，可能导致实验失败、数据不可靠、交叉污染等影响。以下是关于细胞、微生物、PCR实验室污染的识别、排除及预防干货，帮助你维持实验环境的高质量标准！💡

1. 识别污染类型

🔍 1) 细胞培养污染

🔍 2) 微生物实验污染

🔍 3) PCR实验污染

2. 污染的排除与清理

✅ 细胞培养污染排除

1. 细菌/真菌污染

   • 立即丢弃污染细胞，培养瓶、培养基直接高压灭菌
   • 实验台彻底消毒（70%乙醇擦拭、紫外灯30 min）
   • 所有移液枪、培养箱更换过滤头，检查CO₂培养箱是否受污染
   • 减少抗生素依赖，定期检测支原体

2. 支原体污染

   • PCR/ELISA检测支原体，若阳性→污染细胞必须废弃！
   • Mycoplasma去除试剂（如Plasmocin™） 处理培养液
   • 所有培养箱、试剂紫外照射

✅ 微生物实验污染排除

1. 培养基污染

   • 过滤/高压灭菌（121°C，15 min）
   • 液体培养基可添加抗生素
   • 观察菌落特征，确保单菌纯培养

2. 菌种污染

   • 重新划线分离
   • 16S rRNA / MALDI-TOF 鉴定

✅ PCR实验污染排除

1. 扩增产物污染

   • 单独PCR室操作
   • 使用一次性耗材（枪头、管子）
   • 每次实验后紫外灭菌
   • 稀释新试剂（避免环境DNA污染）

2. 引物二聚体

   • 调整退火温度
   • 优化引物设计
   • 酶浓度优化

3. 预防污染的核心策略

✅ （1）分区管理

• 细胞培养、PCR扩增、菌种培养 必须分区
• 无菌操作区与一般实验区隔离

✅ （2）无菌操作

• 细胞培养时，酒精喷洒所有物品
• PCR前，所有实验区紫外消毒
• 微生物实验，培养基前后严格高压灭菌

✅ （3）设备与环境管理

• CO₂培养箱 每月高温消毒（180°C）
• PCR实验前后更换手套
• HEPA空气过滤器定期更换，减少环境微生物

4. 总结

🚀 生物实验室污染排除 3 步法： 1️⃣ 快速诊断污染类型（细胞、微生物、PCR污染） 2️⃣ 立即清除污染源（污染样本丢弃+高温消毒） 3️⃣ 建立无污染实验体系（分区管理+HEPA过滤+无菌操作）

🔬 严格执行标准流程，保持实验室无菌环境，确保高质量实验数据！ 🔥