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WRL68人正常肝细胞

BLUEFBIO™ Product Sheet

细胞名称	WRL68人正常肝细胞
货物编码	BFN608007148
产品规格	T25培养瓶x1	1.5ml冻存管x2
细胞数量	1x10^6	1x10^6
保存温度	37℃	-198℃
运输方式	常温保温运输	干冰运输
安全等级	1
用途限制	仅供科研用途 1类

培养体系	DMEM高糖培养基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%双抗（Hyclone）
培养温度	37℃	二氧化碳浓度	5%
简介	该细胞取自30岁女性白人供体。近年文献显示，该细胞源头可能被HELA污染，请各位学者注意。
注释
STR信息	Amelogenin X CSF1PO 9,10 D5S818 11,12 D7S820 8,12 D13S317 12,13.3 (ATCC) 12,14 (ECACC) D16S539 9,10 TH01 7 TPOX 8,12 vWA 16,18
参考文献	Patent=CA999546A Apostolov K. Human liver cell line. Patent number CA999546A, 09-Nov-1976 Patent=US3935066 Apostolov K. Cell lines. Patent number US3935066, 27-Jan-1976 PubMed=8389256; DOI=10.1093/carcin/14.5.987 Hsu I.C., Tokiwa T., Bennett W., Metcalf R.A., Welsh J.A., Sun T., Harris C.C. p53 gene mutation and integrated hepatitis B viral DNA sequences in human liver cancer cell lines. Carcinogenesis 14:987-992(1993) PubMed=7522099; DOI=10.1007/BF02634356 Gutierrez-Ruiz M.C., Bucio L., Souza V., Gomez J.J., Campos C., Carabez A. Expression of some hepatocyte-like functional properties of WRL-68 cells in culture. In Vitro Cell. Dev. Biol. Anim. 30:366-371(1994) PubMed=20143388; DOI=10.1002/ijc.25242 Capes-Davis A., Theodosopoulos G., Atkin I., Drexler H.G., Kohara A., MacLeod R.A.F., Masters J.R.W., Nakamura Y., Reid Y.A., Reddel R.R., Freshney R.I. Check your cultures! A list of cross-contaminated or misidentified cell lines. Int. J. Cancer 127:1-8(2010)

验收细胞注意事项

1、收到WRL68人正常肝细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。

2、收到WRL68人正常肝细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。

3、收到WRL68人正常肝细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右，血清浓度还是在 10％。

4、收到WRL68人正常肝细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。

6、24 小时后，WRL68人正常肝细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。

7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。

特别提醒： 原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。