鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH DF-1
BLUEFBIO™ Product Sheet
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细胞名称 |
鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1 |
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货物编码 |
BFN60800631 |
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产品规格 |
T25培养瓶x1 |
1.5ml冻存管x2 |
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细胞数量 |
1x10^6 |
1x10^6 |
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保存温度 |
39℃ |
-198℃ |
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运输方式 |
常温保温运输 |
干冰运输 |
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安全等级 |
1 |
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用途限制 |
仅供科研用途 3类 |
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培养体系 |
DMEM高糖培养基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%双抗（Hyclone） |
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培养温度 |
39℃ |
二氧化碳浓度 |
5% |
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简介 |
鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1是起源于10日龄的ELL-0鸡蛋的鸡细胞株，自发永生化。分离原代鸡胚成纤维细胞并在培养液中培养；传代直到衰老；在衰老过程中离心以保持细胞培养在30%到60%满；不衰老的克隆进行鉴定并传代不少于30次。在软琼脂上没有观察到克隆增殖，说明这些细胞是永生化而没有转化。这株细胞可作为病毒增殖、重组蛋白表达和重组病毒生产的基质。 |
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注释 |
Group: Bird cell line. Doubling time: 13.22 hours (in DMEM/F-12 medium), 33.64 hours (in MEM medium), 15.30 hours (in RPMI 1640 medium), 21.39 hours (in DMEM medium) (CelloPub=CLPUB00401). Omics: Transcriptome analysis. |
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STR信息 |
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参考文献 |
Patent=US5672485 Foster D.N., Foster L.K. Immortalized cell lines for virus growth. Patent number US5672485, 30-Sep-1997
PubMed=9721238; DOI=10.1006iro.1998.9290 Himly M., Foster D.N., Bottoli I., Iacovoni J.S., Vogt P.K. The DF-1 chicken fibroblast cell line: transformation induced by diverse oncogenes and cell death resulting from infection by avian leukosis viruses. Virology 248:295-304(1998)
PubMed=9721239; DOI=10.1006iro.1998.9291 Schaefer-Klein J., Givol I., Barsov E.V., Whitcomb J.M., VanBrocklin M., Foster D.N., Federspiel M.J., Hughes S.H. The EV-O-derived cell line DF-1 supports the efficient replication of avian leukosis-sarcoma viruses and vectors. Virology 248:305-311(1998)
PubMed=16313905; DOI=10.1016/j.febslet.2005.10.066 Christman S.A., Kong B.-W., Landry M.M., Kim H., Foster D.N. Modulation of p53 expression and its role in the conversion to a fully immortalized chicken embryo fibroblast line. FEBS Lett. 579:6705-6715(2005)
CLPUB00401 Arifin M.A., Azmir M., Maizirwan M., Raha A.R., Sharifah S.H., Aini I. Comparison of growth rate and viability of DF-1 cell line in different culture media. (In) Abstracts of the 2nd International Conference on Science and Technology; pp.1-5; Universiti Teknologi MARA; Pulau Pinang (2008)
PubMed=18638503; DOI=10.1016/j.jviromet.2008.06.019 Lee C.-W., Jung K., Jadhao S.J., Suarez D.L. Evaluation of chicken-origin (DF-1) and quail-origin (QT-6) fibroblast cell lines for replication of avian influenza viruses. J. Virol. Methods 153:22-28(2008)
PubMed=19941903; DOI=10.1016/j.jviromet.2009.11.022 Karger A., Bettin B., Lenk M., Mettenleiter T.C. Rapid characterisation of cell cultures by matrix-assisted laser desorption/ionisation mass spectrometric typing. J. Virol. Methods 164:116-121(2010)
PubMed=22111699; DOI=10.1186/1471-2164-12-571 Kong B.-W., Lee J.Y., Bottje W.G., Lassiter K., Lee J., Foster D.N. Genome-wide differential gene expression in immortalized DF-1 chicken embryo fibroblast cell line. BMC Genomics 12:571-571(2011) |
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验收细胞注意事项
1、收到鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右 ，血清浓度还是在 10％。
4、收到鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。
6、24 小时后，鸡胚胎成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。
特别提醒： 原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。
