人肝细胞HL-7702-L-02-
BLUEFBIO™ Product Sheet
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细胞名称 |
人肝细胞HL-7702[L-02] |
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货物编码 |
BFN608006124 |
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产品规格 |
T25培养瓶x1 |
1.5ml冻存管x2 |
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细胞数量 |
1x10^6 |
1x10^6 |
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保存温度 |
37℃ |
-198℃ |
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运输方式 |
常温保温运输 |
干冰运输 |
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安全等级 |
1 |
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用途限制 |
仅供科研用途 1类 |
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培养体系 |
DMEM高糖培养基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%双抗（Hyclone） |
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培养温度 |
37℃ |
二氧化碳浓度 |
5% |
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简介 |
人肝细胞HL-7702[L-02] 取自女性，亚洲人。有报道显示，该细胞源头被HeLa所污染，细胞准确性公认下降，请各位学者注意。建议采用本库中HHL-5人正常肝细胞作为替换。 |
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注释 |
Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=26116706). Originally thought to originate from a normal fetal liver. Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Proteome analysis. Omics: SNP array analysis. Omics: Transcriptome analysis. |
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STR信息 |
Amelogenin X CSF1PO 10 D3S1358 15,18 D5S818 11,12 D7S820 12 D8S1179 12 D13S317 13.3 D16S539 9,10 D18S51 16 D21S11 27,28 FGA 18,21 Penta D 8,15 Penta E 7,17 TH01 7 TPOX 12 vWA 16,18 |
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参考文献 |
PubMed=23498809; DOI=10.1016/j.transproceed.2012.09.121 Hu X., Yang T., Li C., Zhang L., Li M., Huang W., Zhou P. Human fetal hepatocyte line, L-02, exhibits good liver function in vitro and in an acute liver failure model. Transplant. Proc. 45:695-700(2013)
PubMed=23505090; DOI=10.1002/hep.26402 Wang K., Lim H.Y., Shi S., Lee J., Deng S., Xie T., Zhu Z., Wang Y., Pocalyko D., Yang W.J., Rejto P.A., Mao M., Park C.-K., Xu J. Genomic landscape of copy number aberrations enables the identification of oncogenic drivers in hepatocellular carcinoma. Hepatology 58:706-717(2013)
PubMed=26116706; DOI=10.1096.14-266718 Ye F., Chen C.-G., Qin J., Liu J., Zheng C.-Y. Genetic profiling reveals an alarming rate of cross-contamination among human cell lines used in China. FASEB J. 29:4268-4272(2015)
PubMed=26143199; DOI=10.1016/j.jhazmat.2015.06.031 Cui R., Zhang H.-X., Guo X.-J., Cui Q.-Q., Wang J.-S., Dai J.-Y. Proteomic analysis of cell proliferation in a human hepatic cell line (HL-7702) induced by perfluorooctane sulfonate using iTRAQ. J. Hazard. Mater. 299:361-370(2015) |
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验收细胞注意事项
1、收到人肝细胞HL-7702[L-02]细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到人肝细胞HL-7702[L-02]细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人肝细胞HL-7702[L-02]细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右 ，血清浓度还是在 10％。
4、收到人肝细胞HL-7702[L-02]细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。
6、24 小时后，人肝细胞HL-7702[L-02]细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。
特别提醒： 原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。
