人胚肺成纤维细胞WI-38
BLUEFBIO™ Product Sheet
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细胞名称 |
人胚肺成纤维细胞WI-38 |
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货物编码 |
BFN60800671 |
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产品规格 |
T25培养瓶x1 |
1.5ml冻存管x2 |
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细胞数量 |
1x10^6 |
1x10^6 |
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保存温度 |
37℃ |
-198℃ |
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运输方式 |
常温保温运输 |
干冰运输 |
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安全等级 |
1 |
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用途限制 |
仅供科研用途 2类 |
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培养体系 |
MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS；1%NEAA 经验证，该细胞可用DMEM高糖完全培养基（不含丙酮酸钠）培养。 |
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培养温度 |
37℃ |
二氧化碳浓度 |
5% |
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简介 |
人胚肺成纤维细胞WI-38细胞由LeonardHayflick建系；有限传代细胞系；寿命为50±10代（倍增时间24h）；来自妊娠3个月的正常胚胎肺组织。该细胞系是第一个用于人疫苗制备的人二倍体细胞；培养基中添加TNFα可以加快细胞生长。 人胚肺成纤维细胞WI-38细胞源于ATCC(CCL-75) | ||
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注释 |
Group: Space-flown cell line (cellonaut). Group: Vaccine production cell line. Part of: Naval Biosciences Laboratory (NBL) collection (transferred to ATCC in 1982). Biotechnology: Used for the production of RA27/3 - the first rubella virus vaccine. Biotechnology: Used for the production of live oral adenovirus type 4 and type 7 vaccine used by the US military. Produced first by Wyeth Laboratories from 1971 to 1999 and from 2011 onward by Barr Pharmaceuticals. Biotechnology: Was used in the early 1970's for the production of the Human Diploid Cell Vaccine (HDCV) vaccine against rabies by Institut Merieux. Characteristics: Used in many context such as senescence and aging studies. Characteristics: Life expectancy of 50 +- 10 population doublings. Characteristics: Senesces at 38 PDL (PubMed=17395773). Doubling time: ~24 hours (ATCC; ECACC). Omics: miRNA expression profiling. Omics: SNP array analysis. Omics: Transcriptome analysis. Anecdotal: Hayflick when numbering diploid cell strains 'jumped' directly from WI-27 (which failed) to WI-38 (CelloPub=CLPUB00391). Anecdotal: Have been flown in space on Skylab-3 to study growth in microgravity (PubMed=352912). Derived from sampling site: Fetal lung. |
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STR信息 |
Amelogenin：X；CSF1PO：10，12；D13S317：11；D16S539：11，12；D18S51：16，18；D19S433：13，16.2；D21S11：30，30.2；D2S1338：19，25；D3S1358：16，17；D5S818：10；D7S820：9，11；D8S1179：14；FGA：22，24；TH01：8，9.3；TPOX：8；vWA：19，20； |
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参考文献 |
DOI=10.1038/498407a Nature editorial staff A culture of consent. Nature 498:407-407(2013)
DOI=10.1038/498422a Wadman M. Medical research: cell division. Nature 498:422-426(2013)
PubMed=25063771; DOI=10.18632/aging.100679 Sidler C., Woycicki R., Kovalchuk I., Kovalchuk O. WI-38 senescence is associated with global and site-specific hypomethylation. Aging (Albany NY) 6:564-574(2014)
PubMed=25903999; DOI=10.1002/biot.201400388 Genzel Y. Designing cell lines for viral vaccine production: where do we stand? Biotechnol. J. 10:728-740(2015)
CLPUB00391 Wadman M. The vaccine race: science, politics, and the human costs of defeating disease. (In) ISBN 9780525427537; pp.1-436; Viking; New York (2016) |
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验收细胞注意事项
1、收到人胚肺成纤维细胞WI-38细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到人胚肺成纤维细胞WI-38细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人胚肺成纤维细胞WI-38细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右 ，血清浓度还是在 10％。
4、收到人胚肺成纤维细胞WI-38细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。
6、24 小时后，人胚肺成纤维细胞WI-38细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。
特别提醒： 原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。
