人口腔表皮样癌细胞KB
BLUEFBIO™ Product Sheet
|
细胞名称 |
人口腔表皮样癌细胞KB |
|
|
|
货物编码 |
BFN60700263 |
||
|
产品规格 |
T25培养瓶x1 |
1.5ml冻存管x2 |
|
|
细胞数量 |
1x10^6 |
1x10^6 |
|
|
保存温度 |
37℃ |
-198℃ |
|
|
运输方式 |
常温保温运输 |
干冰运输 |
|
|
安全等级 |
1 |
||
|
用途限制 |
仅供科研用途 1类 |
||
|
培养体系 |
DMEM高糖培养基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%双抗（Hyclone） |
||
|
培养温度 |
37℃ |
二氧化碳浓度 |
5% |
|
简介 |
人口腔表皮样癌细胞KB细胞最初认为来源自女性口腔表皮癌组织，有文献报道该细胞起源被HeLa所污染，请各位学者注意。我库保藏一株可替代的细胞株，命名为KBT1，该细胞准确。 |
||
|
注释 |
Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=5641128; PubMed=1246601; PubMed=20143388). Originally thought to originate from an epidermal carcinoma of the mouth. Part of: KuDOS 95 cell line panel. Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00010. Doubling time: ~30 hours (DSMZ). Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Deep RNAseq analysis. Omics: Genome sequenced (low read coverage). Omics: Transcriptome analysis. |
||
|
STR信息 |
Amelogenin X CSF1PO 9,10 D2S1338 17 D3S1358 15,18 D5S818 11,12 D7S820 8,12 D8S1179 12,13 D13S317 12,13.3 (ATCC; CLS; DSMZ; JCRB; KCLB; TKG) 12,14 (CCRID; PubMed=17254797) D16S539 9,10 D18S51 16 D19S433 13,14 D21S11 27,28 FGA 21 Penta D 8,15 Penta E 7,17 TH01 7 TPOX 8,12 vWA 16,18 |
||
|
参考文献 |
PubMed=17325662; DOI=10.1038/sj.onc.1210330 Nakaya K., Yamagata H.D., Arita N., Nakashiro K.-I., Nose M., Miki T., Hamakawa H. Identification of homozygous deletions of tumor suppressor gene FAT in oral cancer using CGH-array. Oncogene 26:5300-5308(2007)
PubMed=20143388; DOI=10.1002/ijc.25242 Capes-Davis A., Theodosopoulos G., Atkin I., Drexler H.G., Kohara A., MacLeod R.A.F., Masters J.R.W., Nakamura Y., Reid Y.A., Reddel R.R., Freshney R.I. Check your cultures! A list of cross-contaminated or misidentified cell lines. Int. J. Cancer 127:1-8(2010)
PubMed=23925245; DOI=10.1038/nature12064 Adey A., Burton J.N., Kitzman J.O., Hiatt J.B., Lewis A.P., Martin B.K., Qiu R., Lee C., Shendure J. The haplotype-resolved genome and epigenome of the aneuploid HeLa cancer cell line. Nature 500:207-211(2013)
CLPUB00484 Xu Z.-H., Sun W.-W., Hang J.-B., Gao B.-L., Hu J.-A. RNA-seq identified a novel functional MET fusion in head and neck cancer 5-8F cell line. Int. J. Clin. Exp. Pathol. 9:8308-8317(2016)
PubMed=28455420; DOI=10.1158/0008-5472.CAN-16-2258 Vaughan L., Glanzel W., Korch C., Capes-Davis A. Widespread use of misidentified cell line KB (HeLa): incorrect attribution and its impact revealed through mining the scientific literature. Cancer Res. 77:2784-2788(2017) |
||
验收细胞注意事项
1、收到人口腔表皮样癌细胞KB细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到人口腔表皮样癌细胞KB细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人口腔表皮样癌细胞KB细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右 ，血清浓度还是在 10％。
4、收到人口腔表皮样癌细胞KB细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。
6、24 小时后，人口腔表皮样癌细胞KB细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。
特别提醒： 原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。
