人肝癌细胞HepAD38
BLUEFBIO™ Product Sheet
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细胞名称 |
人肝癌细胞HepAD38 |
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货物编码 |
BFN608008568 |
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产品规格 |
T25培养瓶x1 |
1.5ml冻存管x2 |
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细胞数量 |
1x10^6 |
1x10^6 |
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保存温度 |
37℃ |
-198℃ |
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运输方式 |
常温保温运输 |
干冰运输 |
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安全等级 |
1 |
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用途限制 |
仅供科研 2类 |
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培养体系 |
DMEM高糖培养基+10%FBS+1%双抗 |
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培养温度 |
37℃ |
二氧化碳浓度 |
5% |
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简介 |
人肝癌细胞HepAD38取自15岁男性供体，不规则形态，贴壁培养。 |
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注释 |
Biotechnology: Used in a bioassay that permits the large-scale screening of compound libraries for inhibitors of HBV replication. Characteristics: Inducibly expresses an HBV genome under the control of a tet operator/CMV promoter. Upon removal of tetracycline the cell line produces viral RNA and secrete virus-like particles into the supernatant. |
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STR信息 |
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参考文献 |
PubMed=9257747 Ladner S.K., Otto M.J., Barker C.S., Zaifert K., Wang G.-H., Guo J.-T., Seeger C., King R.W. Inducible expression of human hepatitis B virus (HBV) in stably transfected hepatoblastoma cells: a novel system for screening potential inhibitors of HBV replication. Antimicrob. Agents Chemother. 41:1715-1720(1997)
Patent=US5723319 King R.W., Barker C.S., Seeger C. Cultured cell line that inducibly expresses the hepatitis B virus genome, and uses thereof for screening antiviral substances. Patent number US5723319, 03-Mar-1998
PubMed=9875378 Ladner S.K., Miller T.J., Otto M.J., King R.W. The hepatitis B virus M539V polymerase variation responsible for 3TC resistance also confers cross-resistance to other nucleoside analogues. Antivir. Chem. Chemother. 9:65-72(1998)
PubMed=21331898; DOI=10.1385/1-59259-245-7:43 King R.W., Ladner S.K. Hep AD38 assay: a high-throughput, cell-based screen for the evaluation of compounds against hepatitis B virus. Methods Mol. Med. 24:43-50(2000) |
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验收细胞注意事项
1、收到人肝癌细胞HepAD38细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到人肝癌细胞HepAD38细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人肝癌细胞HepAD38细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右 ，血清浓度还是在 10％。
4、收到人肝癌细胞HepAD38细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。
6、24 小时后，人肝癌细胞HepAD38细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。
特别提醒： 原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。
