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上海细胞库-ATCC细胞库-DSMZ细胞库-细胞库    科研细胞1类    人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17

人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17

 

BLUEFBIO™ Product Sheet

 

细胞名称

人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17                 

img1

货物编码

BFN60700176

产品规格

T25培养瓶x1

1.5ml冻存管x2

细胞数量

1x10^6

1x10^6

保存温度

37℃

-198℃

运输方式

常温保温运输

干冰运输

安全等级

1

用途限制

仅供科研用途 1类

 

培养体系

DMEM高糖培养基(Hyclone)+10%胎牛血清(Gibco)+1%双抗(Hyclone)

培养温度

37℃

二氧化碳浓度

5%

简介

人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17细胞系源自一位2岁患有神经母细胞瘤男童的骨髓,是SK-N-BE(2)神经母细胞瘤的一个克隆;细胞多层生长,随着培养时间细胞会聚集、漂浮。该细胞本质上为贴壁细胞,请各位学者注意。

注释

倍增时间34h

STR信息

Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:16,26;D19S433:12,13;D21S11:30,32.2;D2S1338:23;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:13,14;FGA:22,25;TH01:6;TPOX:11;vWA:18;

参考文献

/

 

 

1、收到人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快联系。

2、收到人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17细胞,如包装完好,请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,出现此状态时,请不要打开细胞培养瓶,应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右,让细胞先稳定下,再于显微镜下观察,此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁,请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。

3、收到人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17细胞后,请镜下观察细胞,用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多,请离心收集细胞,接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液,使用新鲜配制的培养基,使用进口胎牛血清。刚接到细胞,若细胞不多时 血清浓度可以加到 15%去培养。若细胞迏到 80%左右 ,血清浓度还是在 10%。

4、收到人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17细胞时如无异常情况 ,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养基吸出,留下 5-10ML 培养基继续培养:超过 80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液,1000 转/分钟离心 3 分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养,盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里,存放于 4℃冰箱,以备不时之需。

6、24 小时后,人神经母细胞瘤细胞BE(2)-M17细胞形态已恢复并贴满瓶壁,即可传代。(贴壁细胞)将培养瓶里的培养基倒去,加 3-5ml(以能覆盖细胞生长面为准)PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化,消化时间以具体细胞为准,一般 1-3 分钟,不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁,见细胞脱落下来,加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后将溶液吸入离心管内离心,1000rpm/5min。弃上清,视细胞数量决定分瓶数,一般一传二,如细胞量多可一传三,有些细胞不易传得过稀,有些生长较快的细胞则可以多传几瓶,以具体细胞和经验为准。(悬浮细胞)用移液管轻轻吹打瓶壁,直接将溶液吸入离心管离心即可。

7、贴壁细胞 ,悬浮细胞。严格无菌操作。换液时,换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液,37℃,5%CO2 培养。

 

特别提醒: 原瓶中培养基不宜继续使用,请更换新鲜培养基培养。