小鼠肥大细胞瘤细胞P815

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BLUEFBIO™ Product Sheet

细胞名称	小鼠肥大细胞瘤细胞P815
货物编码	BFN60700214
产品规格	T25培养瓶x1	1.5ml冻存管x2
细胞数量	1x10^6	1x10^6
保存温度	37℃	-198℃
运输方式	常温保温运输	干冰运输
安全等级	1
用途限制	仅供科研用途 1类

培养体系	DMEM高糖培养基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%双抗（Hyclone）
培养温度	37℃	二氧化碳浓度	5%
简介	小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞源自DBA/2小鼠的肥大细胞瘤；可吞噬乳胶微球，但不吞噬酵母聚糖或卡介苗，没有抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。硫酸右旋糖酐、LPS或PPD不能抑制细胞生长；产生溶菌酶；鼠痘病毒阴性。该细胞引种自ATCC TIB-64
注释	Part of: Tumor Immunology Bank (TIB) collection from Salk (transferred to ATCC in 1981). Doubling time: ~18-22 hours (DSMZ). Omics: SNP array analysis. Misspelling: P825; Occasionally.
STR信息	Mouse STR 1-1 16,17 Mouse STR 1-2 14,17,18 Mouse STR 2-1 15 Mouse STR 3-2 13,14 Mouse STR 4-2 20.3 Mouse STR 5-5 13 Mouse STR 6-4 17,18 Mouse STR 6-7 12 Mouse STR 7-1 27 Mouse STR 8-1 16 Mouse STR 11-2 16,17,18 Mouse STR 12-1 17 Mouse STR 13-1 17,18 Mouse STR 15-3 20.3,21.3 Mouse STR 17-2 17 Mouse STR 18-3 17 Mouse STR 19-2 12 Mouse STR X-1 27
参考文献	PubMed=1234049; DOI=10.1002/eji.1830050208 Kiessling R., Klein E., Wigzell H. 'Natural' killer cells in the mouse. I. Cytotoxic cells with specificity for mouse Moloney leukemia cells. Specificity and distribution according to genotype. Eur. J. Immunol. 5:112-117(1975) DOI=10.2220/biomedres.5.19 Yanagisawa M., Hasegawa H., Ichiyama A., Hosoda S., Nakamura W. Comparison of serotonin-producing murine mastocytomas, P-815 and FMA3: determination of tryptophan hydroxylase, aromatic L-amino acid decarboxylase, and cellular concentration of tryptophan, 5- hydroxytryprophan, 5-hydroxytryptamine and 5-hydroxyindoleacetic acid. Biomed. Res. 5:19-28(1984) PubMed=3792703; DOI=10.1111/j.1432-0436.1986.tb00568.x Leenen P.J.M., Jansen A.M.A.C., van Ewijk W. Murine macrophage cell lines can be ordered in a linear differentiation sequence. Differentiation 32:157-164(1986) PubMed=7513208; DOI=10.1182ood.V83.9.2619.2619 Tsujimura T., Furitsu T., Morimoto M., Isozaki K., Nomura S., Matsuzawa Y., Kitamura Y., Kanakura Y. Ligand-independent activation of c-kit receptor tyrosine kinase in a murine mastocytoma cell line P-815 generated by a point mutation. Blood 83:2619-2626(1994) PubMed=10210327; DOI=10.1016/S0301-472X(98)00075-7 London C.A., Galli S.J., Yuuki T., Hu Z.-Q., Helfand S.C., Geissler E.N. Spontaneous canine mast cell tumors express tandem duplications in the proto-oncogene c-kit. Exp. Hematol. 27:689-697(1999) PubMed=18432777; DOI=10.1002/0471142735.im2004s43 Gajewski T.F., Markiewicz M.A., Uyttenhove C. The P815 mastocytoma tumor model. Curr. Protoc. Immunol. 43:20.4.1-20.4.18(2001) PubMed=25277546; DOI=10.1186/1471-2164-15-847 Didion J.P., Buus R.J., Naghashfar Z., Threadgill D.W., Morse H.C. III, de Villena F.P. SNP array profiling of mouse cell lines identifies their strains of origin and reveals cross-contamination and widespread aneuploidy. BMC Genomics 15:847-847(2014) PubMed=31220119; DOI=10.1371/journal.pone.0218412 Almeida J.L., Dakic A., Kindig K., Kone M., Letham D.L.D., Langdon S., Peat R., Holding-Pillai J., Hall E.M., Ladd M., Shaffer M.D., Berg H., Li J., Wigger G., Lund S., Steffen C.R., Fransway B.B., Geraghty B., Natoli M., Bauer B., Gollin S.M., Lewis D.W., Reid Y.A. Interlaboratory study to validate a STR profiling method for intraspecies identification of mouse cell lines. PLoS ONE 14:E0218412-E0218412(2019)

验收细胞注意事项

1、收到小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。

2、收到小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。

3、收到小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右，血清浓度还是在 10％。

4、收到小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。

6、24 小时后，小鼠肥大细胞瘤细胞P815细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。

7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。

特别提醒：原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。