人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2
BLUEFBIO™ Product Sheet
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细胞名称 |
人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2 |
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货物编码 |
BFN60700259 |
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产品规格 |
T25培养瓶x1 |
1.5ml冻存管x2 |
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细胞数量 |
1x10^6 |
1x10^6 |
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保存温度 |
37℃ |
-198℃ |
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运输方式 |
常温保温运输 |
干冰运输 |
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安全等级 |
1 |
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用途限制 |
仅供科研用途 1类 |
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培养体系 |
DMEM高糖培养基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%双抗（Hyclone） |
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培养温度 |
37℃ |
二氧化碳浓度 |
5% |
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简介 |
人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2 细胞属源于正常肾的近曲小管细胞，通过导入HPV-16E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN16E6/E7转染外生包装细胞Psi-2，Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317，最后将PA317产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN16E6/E7中含有新霉素抗性，但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。该细胞引种自ATCC CRL-2190 |
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注释 |
Part of: Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) project. Transfected with: UniProtKB; P00552; Transposon Tn5 neo. Transformant: NCBI_TaxID; 333760; Human papillomavirus type 16 (HPV16) [E6/E7 (pLXSN)]. Omics: SNP array analysis.
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STR信息 |
Amelogenin X (CCRID) X,Y (AddexBio; ATCC; KCLB) CSF1PO 13 D2S1338 17,25 D3S1358 16,17 D5S818 12 D7S820 10,11 D8S1179 10,14 D13S317 9 D16S539 11,12 D18S51 12 D19S433 15,15.2 D21S11 28,30 FGA 20,22 TH01 9 TPOX 8,9 vWA 17,18 |
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参考文献 |
PubMed=22949125; DOI=10.1002/ijc.27822 Pawlowski R., Muhl S.M., Sulser T., Krek W., Moch H., Schraml P. Loss of PBRM1 expression is associated with renal cell carcinoma progression. Int. J. Cancer 132:E11-E17(2013)
PubMed=28489074; DOI=10.1038/ncomms15165 Sinha R., Winer A.G., Chevinsky M., Jakubowski C., Chen Y.-B., Dong Y., Tickoo S.K., Reuter V.E., Russo P., Coleman J.A., Sander C., Hsieh J.J., Hakimi A.A. Analysis of renal cancer cell lines from two major resources enables genomics-guided cell line selection. Nat. Commun. 8:15165-15165(2017)
PubMed=30894373; DOI=10.1158/0008-5472.CAN-18-2747 Dutil J., Chen Z., Monteiro A.N., Teer J.K., Eschrich S.A. An interactive resource to probe genetic diversity and estimated ancestry in cancer cell lines. Cancer Res. 79:1263-1273(2019)
PubMed=31068700; DOI=10.1038/s41586-019-1186-3 Ghandi M., Huang F.W., Jane-Valbuena J., Kryukov G.V., Lo C.C., McDonald E.R. III, Barretina J., Gelfand E.T., Bielski C.M., Li H., Hu K., Andreev-Drakhlin A.Y., Kim J., Hess J.M., Haas B.J., Aguet F., Weir B.A., Rothberg M.V., Paolella B.R., Lawrence M.S., Akbani R., Lu Y., Tiv H.L., Gokhale P.C., de Weck A., Mansour A.A., Oh C., Shih J., Hadi K., Rosen Y., Bistline J., Venkatesan K., Reddy A., Sonkin D., Liu M., Lehar J., Korn J.M., Porter D.A., Jones M.D., Golji J., Caponigro G., Taylor J.E., Dunning C.M., Creech A.L., Warren A.C., McFarland J.M., Zamanighomi M., Kauffmann A., Stransky N., Imielinski M., Maruvka Y.E., Cherniack A.D., Tsherniak A., Vazquez F., Jaffe J.D., Lane A.A., Weinstock D.M., Johannessen C.M., Morrissey M.P., Stegmeier F., Schlegel R., Hahn W.C., Getz G., Mills G.B., Boehm J.S., Golub T.R., Garraway L.A., Sellers W.R. Next-generation characterization of the Cancer Cell Line Encyclopedia. Nature 569:503-508(2019)
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验收细胞注意事项
1、收到人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。
2、收到人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止 3-5 小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。
3、收到人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到 15％去培养。若细胞迏到 80%左右 ，血清浓度还是在 10％。
4、收到人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下 5-10ML 培养基继续培养：超过 80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000 转/分钟离心 3 分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
5、将培养瓶置于 37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以备不时之需。
6、24 小时后，人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2细胞形态已恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加 3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS 或 Hanks’液洗涤后弃去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般 1-3 分钟，不超过 5 分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入 3-5ml 培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。
7、贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2 培养。
特别提醒： 原瓶中培养基不宜继续使用，请更换新鲜培养基培养。
